| 脑红蛋白与Na^＋，K^＋-ATP酶β2亚基的相互作用及作用位点的鉴定 |
| 徐文琳[1] 王春丽[1] 张永亮[1] 廖志勇[1] 余利红[1] 孟凡伟[1] 王新兴[2] 尹昭云[2] 钱令嘉[2] 张成岗[1] |
| 关键词：脑红蛋白 Na^＋，K^＋-ATP酶 β2亚基 作用位点 酵母双杂交系统 蛋白质相互作用 免疫共沉淀 |
| 主要内容：为研究神经系统特异性携氧蛋白——脑红蛋白(NGB)保护神经元耐受缺氧损伤的分子机制，利用酵母双杂交系统从人胎脑cDNA文库中筛选与其有相互作用的蛋白质。序列分析表明，其中一个克隆的编码产物与Na^+，K^+ATP酶β2亚基(NKA1b2)序列一致。随后采用PCR方法从人胎脑cDNA文库中扩增获得NKA1b2全长cDNA。蛋白质结合实验表明，原核表达的NGB与体外转录翻译得到的NKA1b2在细胞外有结合作用。免疫共沉淀实验证明二者在生理条件下能够以复合物的形式存在。利用NGB系列短截体研究相互作用的位点发现，NGB蛋白N末端1～75位氨基酸可与：NKA1b2结合，但结合力很弱，而其C末端75个氨基酸则与NKA1b2无结合作用，由此推测NGB蛋白整体的三维结构是结合所必需的。 |
| 《生物化学与生物物理学报：英文版》 2003,35(9).-823-828 |
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