离子交换色谱法对肌肉中钙激活酶分离纯化的研究
 
孔保华 刁新平 郑冬梅

关键词:钙激活酶 离子交换色谱 分离纯化
 
主要内容:试验通过离子交换色谱法对肌肉中钙激活酶(Calpain)进行定量分析研究,确定了Calpain粗提液制备工艺。对Calpain粗提液进行全波长紫外扫描说明276~280nm处有一个吸收高峰。应用DEAE离子交换层析对Calpaiil进行纯化,用0~500mmol·L^-1 NaCl Tris-HCl进行离子强度线性梯度洗脱,在280nm波长下测定洗脱液的光吸收值,洗脱得3个蛋白峰,μ-Calpain和m-Calpain分别在NaCl为130~l80mmol·L^-1和260~300mmol·L^-1时洗脱下来,钙激活酶抑制蛋白(Calpastatin)在NaCl为70~110mmol·L^-1时洗脱下来。Calpain分子量为110000u.通过电泳试验表明,本检测结果提取液正好在分子量约为110000u处有一条清晰的带,说明所得提取物为Calpain,而且纯度较高。
 
《东北农业大学学报.2004,35(4).-449-453》  
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