| 重组人组织型纤溶酶原激活剂改构体的表达、复性与分离纯化 |
| 冯长根[1] 陈嫚[1] 任启生[2] 宋新荣[2] |
| 关键词：重组人组织型纤溶酶原激活剂改构体 表达 复性 纯化 |
| 主要内容：目的获得具有高纯度、高生物活性的重组人组织型纤溶酶原激活剂改构体(瑞替普酶，reteplase．r-PA)。方法reteplase基因克隆到表达质粒pJZ-100中，转化Escherichia coli BL21(DE3)．在0．05mmol·L^-1异丙基硫代-β-半乳糖苷(LPTC)诱导下获得高效表达，表达产物通过脉冲稀释法复性，复性后的蛋白质用ETI-Sepharose 4B亲和色谱纯化。结果表达产物占菌体总蛋白质的20％，脉冲稀释法复性后复性收率为28％，经纯化后纯度达96％以上，比活为580000 IU·mg^-1。结论建立了reteplase表达、复性与纯化工艺，以此工艺可获得高活性高纯度的reteplase。 |
| 《中国药学杂志.2004,39(7).-550-552,557》 |
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