重组人组织型纤溶酶原激活剂(rht—PA)及其突变体的纯化
 
朱恒奇 徐秀英 等

关键词:组织型纤溶酶原激活剂 突变体 纯化
 
主要内容:稳定高效表达人组织型纤溶酶原激活体(rht-PA)的CHO细胞株和表达组合突变体的细胞株进行了3L转瓶培养,将培养上清分别进行了Ls-Speharose 4B亲和层析和Zn^3+-Sepharose 4B层析两步纯化,rht-PA纯度提高了534倍,比活达2.5×10^5IU/mg,产率为73%;突变体纯度提高了1119倍,比活达5.9×10^5IU/mg,产率为69%,纯化产物SDS-PAGE分析显示,rht-PA和突变体基本都呈单一条带,扫描分析均达到98%以上纯度,rht-PA和突变体在纯化系统中的行为作对照分析发现,突变体的构建思想在Lys-Speharose 4B亲和层析过程中有充分体现,这两步层析组合是很好的纯化t-PA及其突变体的方法,尤其是Lys-Sepharose 4B纯化突变体效果更好。
 
《中国生物化学与分子生物学报.2003,19(1).-82-86》  
全文下载请进入http://hightech.stlib.cn/tpi_1/sysasp/include/index.asp
仿站