| 中国红豆杉细胞色素P450还原酶的基因克隆、表达与活性分析 |
| 阮仁余[1,2] 孔建强[1] 郑晓东[1] 张书香[1] 秦成蕴[1] 程克棣[1] 王建明[2] 王伟[1] 遗传 2010,32(11).-1187-1194 |
| 中国红豆杉 细胞色素P450还原酶 诱导表达 |
| 细胞色素P450还原酶（Cytochrome P450 reductase,CPR）是细胞色素P450羟基化酶电子传递链的组成部分,在生物体内起着重要的电子传递作用。文章从中国红豆杉（Taxuswallichiana var. Chinensis）愈伤组织细胞中克隆CPR基因（TchCPR）,TchCPR含有一个2154bp碱基的阅读框,编码717个氨基酸残基;在氨基酸水平上它与裸子植物细胞色素P450还原酶的同源性（〉82%）高于其他被子植物的细胞色素P450还原酶（〈74%）。在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达了全长和从N-端截短不同数目氨基酸残基的6个融合肽段,经亲和层析纯化,分析了表达的不同长度融合蛋白的电子传递效率。结果表明截短长度大于61个氨基酸残基肽段的胞色素P450还原酶都能够诱导表达,在表达水平上无显著差异,而截短61个氨基酸的CPR融合蛋白电子传递的催化活性（1.6057nmol Cyt Cred/min/μg TchCPR融合蛋白）高于其他4个融合蛋白。 |
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