| 海参肠道组织蛋白酶B粗酶提取条件的优化 |
| 于蕾 朱蓓薇 孙黎明 周大勇 秦磊 大连工业大学学报 2010,29(6).-409-412 |
| 海参 组织蛋白酶B 巯基保护剂 |
| 为了获得具有较高活力的海参肠组织蛋白酶B，研究了其粗酶的提取条件。以Z-Arg—Arg—MCA为特异性底物，采用荧光光度法测定了酶活力。对提取海参肠组织蛋白酶B的浸提缓冲液、浸提时间和硫酸铵饱和度进行优化。结果表明，采用含5mmol／LL-半胱氨酸、1mmol／LEDTA、0．2％Triton X-100的50mmol／LpH5．0的NaAc-HAc缓冲液浸提7h后，选择80％饱和度的硫酸铵进行沉淀，能够有效地从海参肠道中提取组织蛋白酶B；同时研究了巯基保护剂对酶活力的影响。结果表明，巯基保护剂可提高酶的活力，这符合组织蛋白酶B结构中含有巯基的特性。在提取粗酶的过程中，添加巯基保护剂可有效地保证酶活力。 |
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