| 高密度发酵P.pastoris组成型表达纤维素二糖水解酶 |
| 崔艳艳[1,2] 易国辉[1] 屠发志[1] 张添元[3] 罗进贤[3] 张爱联[1] |
| 关键词:纤维素二糖水解酶 毕赤酵母 基因表达 纤维素酶活力 |
| 主要内容:用PCR法扩增里氏木霉cbhⅡ基因,并将其克隆到P.pastoris表达载体pGAP9K,获得重组表达质粒pGAP9K-cbhⅡ。通过电转法将cbhⅡ基因整合到P.pastoris的基因组中,然后筛选高G418抗性的克隆作为工程菌菌种。在生物反应器中生产CBHⅡ,将20L发酵液装入50L的发酵罐中,在发酵过程中连续64h补加甘油-PTM4,放罐时生物量为A600=170,CBHⅡ的表达量为75mg/L。其表达产物具有酶解羧甲基纤维素的活性。 |
| 《热带作物学报》 2010(8).-1293-1297 |
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