| 草鱼酸性磷酸酯酶的性质及金属离子对其活性的影响 |
| 杨立红 肖波 王晓洁 侯月利 王佳 孙静 |
| 关键词：草鱼 酸性磷酸酯酶 金属离子 活性 |
| 主要内容：以草鱼肝脏为材料提取一种酸性磷酸酯酶（ACPase,EC.3.1.3.2）,进一步用（NH4）2SO4沉淀分离,Sephadex G-200柱纯化,经聚丙烯酰胺凝胶电泳纯度鉴定呈现单一酶蛋白带,该酶紫外吸收峰为240nm和280nm,等电点为4.8,相对分子质量为100046.1。该酶水解对硝基苯磷酸二钠（pNPP）的最适pH值为4.4,最适温度为45℃,并有热激活现象,热激活温度为60℃。耐热实验表明,该酶在最适温度下耐热时间为33min,最适温度下20min时表现出最大活性。在60℃下耐热时间为25min,15min时表现最大活性。酶促反应初速度为0.0475μmol/min,最大反应速度为0.153μmol/min。米氏常数Km值为3.56×10^-3mol/L。金属离子对酶活性影响的研究结果表明,K＋对酶有激活作用,Li^＋、Na^＋对酶的活性没有明显影响;碱土金属离子Mg^2＋、Ca^2＋和Ba^2＋对酶有激活作用,其激活程度由大到小依次为：Ba^2＋、Mg^2＋、Ca^2＋;Mn^2＋对酶有激活作用,Zn^2＋、Cu^2＋、Co^2＋则有抑制作用;重金属离子Hg^2＋、Pb^2＋、Ag^＋和Cd^2＋对酶有抑制作用,其中Hg^2＋的抑制效应最强。Mg^2＋和Cu^2＋的作用机制研究结果表明,Mg^2＋对酶具有混合型激活作用,Cu^2＋对酶具有竞争性抑制作用。 |
| 《中国水产科学》 2010,17(5).-969-976 |
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