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WRK对枯草芽孢杆菌NX-2产出的γ-谷氨酰转肽酶的不可逆抑制动力学

肖彦羚周治姚忠宋希文余维娜刘步云徐虹韦萍高校化学工程学报 2010,24(1).-87-92

γ-谷氨酰转肽酶：不可逆抑制动力学 WRK

γ-谷氨酰转肽酶（GGT；EC2．3．2．2）催化的酰基转移反应可用于制备各种具有生理活性的谷氨酰化合物，对其开展酶活力不可逆抑制动力学研究对于阐明GGT的作用机制具有重要意义。今以化学抑制剂Woodwards Reagent K（WRK）与枯草芽孢杆菌NX-2产出的GGT进行不可逆抑制反应，根据邹氏理论测得WRK对GGT不可逆抑制反应的微观速率常数岛为0．03015s-1，WRK与酶结合常数局为1．352mmol·L-1。有抑制剂存在下GGT与供体γ-谷氨酰对硝基苯胺的亲和力常数Km=3．245mmol·L-1，GGT酰基化最大反应速度Vmax=0．3771mmol．（L．s）-1。通过对GGT的失活动力学分析得到，失活反应级数为1.313，说明在GGT活性部位至少有一个谷氨酸（或天冬氨酸）残基参与催化反应。