| Candida rugosa脂肪酶同工酶的选择固定化 |
| 辛嘉英 徐毅 等 |
| 关键词：CRL同工酶 对映体 选择性 选择性固定化 Candidarugosa脂肪酶 分离 纯化 |
| 主要内容：采用DEAE－Sepharose CL-6B离子交换层析，将Candida rugosa脂肪酶（CRL）分成了含同工酶CRL A和CRL B的3个组份，CRL A和CRL B在低水－有机溶剂双液相体系中催化（R，S）－普生甲酯的不对称水解反应，具有不同的对映体选择性。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析发现，CRL A和CRL B的分子量几乎相同（约为62000－64000Da)。等电聚焦显示CRL A在等电点pI5.6处有单一条带，CRL B在等电点pI4.2附近有2条带。圆二色谱分析未发现明显结构差异，但在极低的离子强度下它们在疏水载体YWG－C6H5上的吸附速度明显不同。50％异丙醇处理发现，CRL B可解离为CRL A和小分子酸性化合物。据此认为CRL A和CRL B在结构组成上存在着轻微差别，CRL A的活性位点处疏水腔的开放程度较CRL B大，CRL B上非共价结合有一些小分子酸性化合物。据此，分别将其选择性地固定在了疏水性不同的载体YWG－C6H5和YWG－NH2上。本文通过一个简单易行的选择吸附步骤、同时达到了同工酶的分离纯化及固定化目的，提供了一种分离结构上相近的同工酶的便利方法。 |
| 《离子交换与吸附.2002,18(1).-17-22》 |
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