应用蛋白质工程法制备含硒单链抗体酶
 
牟颖[1] 黄华梁[2] 等

关键词:单链抗体酶 包涵体 谷胱甘肽过氧化物酶 硒 化学突变 蛋白质工程法
 
主要内容:目的 制备一种具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性的含硒单链抗体酶。方法 利用RT-PCR方法从杂交瘤细胞株2F3中扩增出单克隆抗体重链可变区和轻链可变区基因。经DNA序列测定后,构建成表达载体pTMF-scFv分别转化入大肠杆菌JM109(DE3)、BL21(DE3)和BL21(coden plus),表达目的蛋白分别占菌体总蛋白的5%-10%、15%-20%和25%-30%。重组蛋白以包函体形式存在,相对分子质量为30000。其GPS活性为3400U/μmol,接近天然酶水平。结论 为工业化制备含硒单链抗体酶奠定基础。
 
《中国生物制品学杂志.2001,14(2).-87-90》  
全文下载请进入http://hightech.stlib.cn/tpi_1/sysasp/include/index.asp
仿站