| 胰蛋白酶对视网膜色素上皮细胞膜MHCⅡ分子表达的影响 |
| 刘少山 惠延年 黄蔚 张鹏 王雨生 马吉献 |
| 关键词：胰蛋白酶 视网膜色素上皮细胞膜 MHCⅡ 流式细胞术 细胞免疫功能 |
| 主要内容：目的 探讨不同浓度胰蛋白酶联合EDTA和机械刮擦等措施，分离培养的视网膜色素上皮(RPE)细胞并保持细胞膜HLA—DR分子活性的最佳条件。方法 常规培养人第3—6代RPE细胞，终浓度为500U／ml的IFN—γ刺激诱导培养4d，采取0．125%胰蛋白酶联合0．01％EDTA或机械刮擦等方法分离细胞；台盼蓝拒染活细胞计数；活细胞HLA—DR间接免疫荧光染色，流式细胞术分析；荧光显微镜观察。结果 0．125%胰蛋白酶+0．01％EDTA+机械刮擦组分离活细胞率最高；FCM检测HLA—DR免疫荧光染色细胞阳性率，0．125％胰蛋白酶+0．01％EDTA+机械刮擦组、机械刮擦组与对照组存在显著性差异；相对单细胞平均荧光强度，机械刮擦组与0．125％胰蛋白酶+0．01％，EDTA+机械刮擦组最高；荧光显微镜下可见机械刮擦组、0．125％胰蛋白酶+0．01％EDTA+机械刮擦组RPE细胞形态保持较好。结论 较低浓度胰蛋白酶结合EDTA联合机械刮擦方法能较好地保持RPE细胞膜结构及其糖蛋白的功能状态。 |
| 《眼科研究》 2003,21(5).-453-456 |
| 全文下载请进入http://hightech.stlib.cn/tpi_1/sysasp/include/index.asp |
微信公众号