| 人尿胰蛋白酶抑制剂的快速纯化 |
| 范俊虎[1] 李汉卿[2] 等 |
| 关键词：人尿 胰蛋白酶抑制剂 亲和层析 纯化 |
| 主要内容：目的 以人尿浓缩物为原料，对人尿胰蛋白酶抑制剂的分离纯化技术进行研究。方法 利用纯胰蛋白酶作为配体偶联于CNBr－Sepharose-4B为亲和载体，在不同条件下洗脱亲和蛋白，可从粗品溶液中快速分离纯化具有胰蛋白抑制活性的两种纯产物。结果 层析图谱与SDS－PAGE分析表明，根据洗脱条件，可将有抑制活性的20kD和40k蛋白质分离为两个单独组分或混合物。其中20kD组份的抑制活性回收为35％，抑制比活为3387U／mg；40kD组份的相应值分别为53％和3116U／mg。混合物的抑制活性回收和抑制比活分别为89％和3076U／mg，再经Superose-12或Superdex-75凝胶渗透层析，分别获得两种组份的纯产物。结论 通过选择性洗脱亲和柱，可快速获得高收率、高纯度的人尿胰蛋白酶抑制剂。 |
| 《中国生化药物杂志》 2001,22(6).-271-274 |
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