| 人胰岛素样生长因子-1基因的克隆、表达和活性检测 |
| 岳凤鸣[3] 赵焕英[1] 杨慧[1] 高福禄[2] 徐群渊[1] |
| 关键词：人胰岛素样生长因子-1 基因克隆 基因表达 检测 生物活性 糖尿病 |
| 主要内容：目的 克隆人胰岛素样生长因子Ⅰ型(hIGF-1)，构建真核表达载体并进行表达及活性检测，为IGF-1基因治疗糖尿病奠定基础。方法 提取胎儿肝脏总RNA，RT-PCR法扩增IGF-1cDNA片段，重组于pUCM-T载体，测序正确后构建表达载体，转染猴肾成纤维细胞系COS-7，用原位杂交和免疫组织化学检测表达，收集培养上清以胰岛素刺激释放实验进行活性测定。结果 扩增得到710bp带有Kozak序列的IGF-1cDNA片段；成功构建了真核表达载体pCI-neo／hIGF-1；IGF-1在COS-7细胞得到了表达，并具有刺激胰岛素分泌的活性。结论 新构建的载体pCI-neo／hIGF-1能在COS-7细胞中表达、分泌，且所分泌的IGF-1具有生物活性。 |
| 《解剖学报》 2003,34(3).-306-311 |
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