| 第一内含子对人胰岛素基因在BHK细胞中表达的影响 |
| 李华[1] 王吉贵[2] 刘维全[3] 王苹[4] 董婉维[1] 齐顺章[2] |
| 关键词：内含子 胰岛素 基因 细胞系 表达 人 BHK细胞 |
| 主要内容：目的 构建人胰胰岛素基因真核表达载体，为胰岛素基因研究奠定基础。方法 从人基因组文库中扩增胰岛素基因的第一内含子，经测序证实其序列完全正确后，与pCMV-mINS中的mINS基因融合，构建成带有第一内含子的胰岛素基因组基因真核表达质粒pCMV-ImINS。分别用pCMV-mINS和pCMV-ImINS转染BHK细胞，经G418筛选，将阳性克隆传至20代后，用放免方法和免疫组化法分析胰胰岛素和，或胰岛素原在BHK细胞中的表达量情况。结果 经放免测定，pCMV-mINS和pCMV—ImINS在BHK细胞中胰岛素和，或胰岛素原的表达量分别为4．077μIU/ml和5．068μIU／ml。经免疫组化分析，pCMV-mINS在BHK细胞质中胰岛素表达水平的灰度值为190．0±19．56；pCMV-ImINS在BHK细胞质中胰岛素表达水平的灰度值为186．4±10．24。结论 在BHK细胞中胰岛素基因的第一内含子对胰岛素的表达起正调控作用。 |
| 《中国实验动物学杂志》 2002,12(5).-257-262 |
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