| 人胰岛素样生长因子—1基因的克隆及其表达 |
| 吴岚晓[1] 李明[2] 等 |
| 关键词：胰岛素样生长因子－1 基因克隆 原核表达 基因工程 IGF－1制剂 糖尿病 药物 |
| 主要内容：目的 获得大量高纯度、具有生物学活性的人胰岛素样生长因子－1（hIGF-1)，构建hIGF-1原核表达载体，并进行表达与纯化。方法 以pUCIGF质粒为模板，PCR扩增了hIGF-1基因。经适当酶切后，构建表达载体pRSET-IGF转入大肠杆菌BL21（DE3）进行表达，并经阴离子交换色谱、疏水色谱和凝胶过滤纯化。结果 带有重组质粒pRSET-IGF的大肠杆菌经IPTG诱导后，以可溶性形式表达7.8kD大小的蛋白，其表达量占菌体总蛋白量的10％－20％，纯化后目的蛋白纯度达95％以上，Western印迹表明重组蛋白具有hIGF-1抗原活性。结论 构建了pRSET-IGF重组质粒，并成功地在大肠杆菌中获得可溶性表达，为获得大量基因工程产品奠定了基础。 |
| 《中国生化药物杂志》 2002,23(1).-1-3 |
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