利用Bac—to—Bac表达系统高效表达胰岛素样生长因子Ⅱ
 
赵红 汪承亚 等

关键词:重组人胰岛素样生长因子Ⅱ Bac-to-Bac表达系统 昆虫细胞
 
主要内容:目的:利用Bac-to-Bac表达系统高效表达成熟的胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)。方法:首先构建含IGF-Ⅱ cDNA的重组供体质粒pFastBacl,然后重组pFastBacl所含的转位元件mini-Tn7,在感受态细胞DH10Bac内转位到粘粒上的连接位点mini-attTn7构成重组粘粒,重组粘粒转染昆虫细胞Sf9产生重组杆状病毒,重组杆状病毒进行感染Sf9细胞。结果:琼脂糖凝胶分析显示重组供体质粒pFastBacl的成功构建;琼脂糖凝胶分析重组粘粒的PCR产物表达已获得重粒粘粒;十二烷基磺酸钠(SDS)-PAGE和Western Blotting显示7KD左右蛋白质条带的出现。结论:利用Bac-to-Bac表达系统成功表达具有免疫学活性的IGF-Ⅱ,可用于临床疾病的诊治。
 
《南京医科大学学报》  2001,21(3).-175-178
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