| 人胰岛素基因杆状病毒表达载体的构建及其在Sf9细胞中的表达 |
| 李华[1] 刘维全[2] 等 |
| 关键词：人胰岛素基因 杆状病毒表达系统 表达载体 Sf9细胞 基因表达 |
| 主要内容：对人胰岛素基因真核表达载体（pCMA／mINS）进行Xho I酶切，回收的含人胰岛素基因组基因的1608bp片段与线性化的杆状病载体pFast Bac I进行连接，获得重组载体pFast/mINS。将该重组载体转化DH10Bac感受态细菌，在体内进行重组，并经2次抗性与蓝白斑筛选，得到杆状病毒重组载体Bacmid/mINS。将该载体转染Sf9细胞，获得了重组杆状病毒，经Tricine-SDS-PAGE和Western-blotting检测，重组杆状病毒在Sf9细胞中的表达产物是胰岛素原，而细胞培养上清中未检测到胰岛素和胰岛素原。 |
| 《中国兽医学报》 2001,21(3).-258-262 |
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