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| 草鱼胰岛素样生长因子—Ⅰ基因在大肠杆菌中的表达 |
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| 叶星[1] 白俊杰[2] 等 |
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| 关键词:草鱼 胰岛素样生长因子-Ⅰ 大肠杆菌 表达 生物活性 |
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| 主要内容:为构建草鱼(Ctenopharyngodon idellus)胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)大肠杆菌表达质粒,对已克隆到的草鱼IGF-Ⅰ基因进行改造,改造后的基因去除了原cDNA的信号肽和E区序列,并在基因的两端分别加入起始密码子和终止密码子,将改造后的编码草鱼IGF-Ⅰ成熟肽基因亚克隆到pBV220中,构建成表达质粒pBVgIGF7。转化大肠杆菌(Escherichia coli)进行表达。SDS-PAGE显示,含重组表达质粒的菌株经热诱导后表达出一约7.5kD的特异蛋白。表达量占菌体总蛋白的20.03%,表达产物主要以包涵体形式存在,重组蛋白经纯化和复性后,采用MTT法测定其对草鱼吻端成纤维细胞PSF和草鱼卵巢细胞CO的促增殖作用。结果表明,所获得的重组草鱼IGF-Ⅰ具有生物活性。 |
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| 《中国生物化学与分子生物学报》 2001,17(6).-725-732 |
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