| 人胰岛素样生长因子—1在大肠杆菌中的表达 |
| 吴岚晓 李明 等 |
| 关键词：胰岛素样生长因子－1 克隆 原核表达 人 大肠杆菌 细胞调控因子 基因工程 |
| 主要内容：为获得大量的人胰岛素样生长因子-1（human Insulin-like Growth Factor-1,hIGF-1)产品，构建了hIGF-1原核表达系统。设计引物，引入Nde I和Hind Ⅲ酶切位点，以人工合成构建的pUCIGF质粒为模板，CR扩增hIGF-1基因。酶切后，克隆于原核表达载体pRSET B中，构建pRSET-IGF重组质粒，转化入肠杆菌BL21（DE3）进行表达。带有重组质粒pRSET-IGF的大肠杆菌BL21（DE3）经IPTG诱导表达后，SDS-PAGE分析表明：可表达出相对分子质量78000的蛋白，重组蛋白以非融合、可溶性形式表达，表达量占菌体总蛋白量的10%～20%，Western印记表明重组蛋白具有hIGF-1的抗原活性。构建的pRSET-IGF重组质粒成功地在大肠杆菌BL21（DE3）中高效可溶性表达，为获得大量基因工程产品奠定了基础。 |
| 《药物生物技术》 2001,8(4).-185-188 |
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