| 黄鳍鲷白细胞介素1β基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 |
| 李建柱[1,2] 江世贵[1] |
| 关键词：黄鳍鲷 Acanthopagrus latus IL-1β RACE 克隆 序列分析 表达 |
| 主要内容：采用同源克隆和RACE-PCR（Rapid amplification of DNA ends-PCR）技术,从黄鳍鲷Acanthopgrus latus中克隆了白细胞介素1β（interleukin-1β, IL-1β）基因的全长cDNA序列.黄鳍鲷IL-1β的cDNA全长共1 242 bp,5端非编码区（UTR）为121 bp,3端非编码区（UTR）为342 bp,开放阅读框（open reading frame, ORF）为762 bp,编码一条253个氨基酸残基的多肽,分子量约为28.5kDa,理论等电点为5.55,含有2个潜在的糖基化位点.同源性分析表明与其它鱼类和脊椎动物的IL-1β序列具有较高的同源性.利用软件SignalP分析表明它不存在信号肽序列,氨基酸序列中不存在IL-1β转换酶（interleukin-1β converting enzyme, ICE）剪切位点,推导可能成熟肽为从第85位氨基酸开始共169个氨基酸残基的多肽,分子量约为18.9kDa.将此成熟肽序列克隆入pQE30质粒构建表达载体pQE30-IL1β,并在大肠杆菌Escherichia coli M15（pREP4）中进行诱导表达,获得了分子量约为21 kDa的特异性融合蛋白. |
| 《热带海洋学报》 2006,25(2).-37-43 |
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