| 用于分离、检测和定量细胞间蛋白的方法 |
| WOUS23075159 2023-9-26 发明申请 |
| 2024-4-4 |
| 公开了用于从复杂的多细胞环境中分离全长细胞间蛋白的方法。 所公开的方法包括在复杂环境中在包含第一化学基团的氨基酸或链烷酸类似物的存在下生长细胞。 第一化学基团(例如，叠氮化物)在生物正交化学反应中与存在于细胞膜不可渗透探针中的第二化学基团(例如，应变炔)反应，所述细胞膜不可渗透探针进一步含有亲水接头和生物素类似物部分(例如，脱硫生物素)。 将氨基酸或链烷酸类似物掺入新合成的细胞周蛋白中，然后使用生物正交反应用探针标记细胞周蛋白，并使用固定化的生物素结合蛋白捕获系统分离细胞周蛋白。 然后可以使用温和洗脱过程以其全长形式回收捕获的蛋白质，用于进一步的下游分析，包括例如蛋白质检测和定量。 所公开的方法可以在体外、离体或体内生长的细胞上进行。 |
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