| 获得分离自哺乳动物组织的去细胞化细胞外基质的方法及其在再生医学中的应用 |
| PL44193522 2022-8-4 发明申请 |
| 2024-2-5 |
| 本申请的主题是获得分离自哺乳动物组织的去细胞化细胞外基质(ECM)的方法，以及其在再生医学中治疗半月板损伤的实例中的用途。获得分离自哺乳动物组织的去细胞化细胞外基质dECM的方法包括：从收集的半月板中除去其他组织的残余物，用纯化水洗涤，然后以已知的方式使用具有大孔筛的电狼研磨半月板，然后再次使用具有较小孔的筛研磨，然后在乳酸溶液中在室温下连续搅拌提取12小时，然后将提取残渣与溶液分离，并将所得溶液冷冻，并将果渣引导至第二次提取，其在与第一步相同的条件下进行，分离后，将获得的溶液冷冻，然后将提取残渣导入下一步骤，其中将浓度为1-6mg/ml的胃蛋白酶溶于盐酸中的溶液加入果渣中，在室温下在连续搅拌下进行水解48小时，然后将获得的混合物在由筛孔尺寸为200 μ m的聚酰胺网制成的分离袋上过滤，之后将获得的滤液送去纯化，并且将水解残余物冷冻，并且在下一阶段中，将滤液中的pH稳定在9，之后将溶液在室温下离心并丢弃上清液，并且通过在-80℃下冷冻72小时将沉积的渗余物冷冻干燥，然后干燥8小时，并且通过冷冻和三个研磨循环将所得冻干的ECM渗余物进行低温研磨过程，并且在研磨完成后，将粉末通过筛孔尺寸在200-400微米范围内的筛子筛分。本申请的主题也是用于治疗半月板损伤的去细胞化细胞外基质。 |
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