| 一种用于产生软骨细胞和/或软骨、任选地关节样非肥大软骨细胞细胞和/或软骨样组织和/或肥大软骨细胞样细胞和/或软骨样组织的方法,所述方法包括:a.用近轴中胚层指定混合物培养原始条纹样中胚层群体,任选地CD56+,PDGFRalpha+KDR-原始条纹样中胚层群体,所述混合物包含:i.FGF激动剂; ii。 BMP抑制剂; 任选地头蛋白、LDN-193189、背吗啡肽; 和dIII。 任选地一种或多种TGFβ抑制剂,任选地SB431524; 和Wnt抑制剂,任选地DKK1、IWP2或XAV939; 指定表达细胞表面CD73、CD105和/或PDGFR-β的近轴中胚层群体; b。 产生软骨细胞前体群体,包括:i.任选地在无血清或含有血清的培养基中以高细胞密度培养表达CD73、CD105和/或PDGFR-β的近轴中胚层群体; ii. 在无血清培养基中用TGFβ3激动剂培养高细胞密度CD73+、CD105+和/或PDGFRβ+近轴中胚层群体以产生高细胞密度Sox9+、胶原2+软骨细胞前体群体; 和DC。 或者i.将高细胞密度Sox9+、胶原2+软骨细胞前体群体与TGFβ3激动剂一起培养延长的时间段,以产生关节样非肥大软骨细胞和/或软骨样组织; orii. 将所述高细胞密度Sox9+胶原2+软骨细胞前体群体与BMP4激动剂一起培养延长的时间段以产生肥大的软骨细胞样细胞和/或软骨样组织。 |