用于产生软骨细胞谱系细胞和/或软骨样组织的方法和组合物
 
AU2022252839  2022-10-14  发明申请

2022-11-10
 
  摘要用于产生软骨细胞谱系细胞和/或软骨样组织的方法和组合物一种用于产生软骨细胞和/或软骨,任选地关节样非肥厚软骨细胞和/或软骨样组织和/或肥厚软骨细胞样细胞和/或软骨样组织的方法,所述方法包括:a.用旁轴中胚层指定混合物培养原始条纹样中胚层群体,任选地CD56+,PDGFRalpha+KDR-原始条纹样中胚层群体,所述混合物包含:i.FGF激动剂; ii.BMP抑制剂; 任选地头蛋白、LDN-193189、背吗啡肽; 以及iii。 任选地一种或多种TGF β抑制剂,任选地SB431524; 和Wnt抑制剂,任选地为DKK1、IWP2或XAV939; 指定表达细胞表面CD73、CD105和/或PDGFR-β的近轴中胚层群体; b. 产生软骨细胞前体群体,其包括:i.任选地在无血清或含血清培养基中培养以高细胞密度表达CD73、CD105和/或PDGFR-β的近轴中胚层群体; ii.在无血清培养基中培养所述高细胞密度CD73+、CD105+和/或PDGFR β+轴旁中胚层群体与TGFβ 3激动剂,以产生高细胞密度Sox9+、胶原2+软骨细胞前体群体; 以及c。 或者i.将高细胞密度Sox9+,胶原2+软骨细胞前体群与TGFbeta3激动剂一起培养延长的时间段,以产生关节样非肥厚软骨细胞和/或软骨样组织; 或ii.将所述高细胞密度Sox9+胶原2+软骨细胞前体群与BMP4激动剂一起培养延长的时间段以产生肥大的软骨细胞样细胞和/或软骨样组织。
 
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