一种制备哺乳动物胆囊细胞外基质水凝胶的方法
 
AU2021104930  2021-8-4  实用新型

2022-5-5
 
  本发明涉及一种用于合成基于胆囊细胞外基质的混合水凝胶的方法。 该方法包括:收集猪胆囊; 通过非洗涤剂/非酶法从收集的猪胆囊中分离出冻干片状的胆囊细胞外基质(C-ECM); 在用胃蛋白酶磨碎冻干CECM片之后,通过酶消化制备C-ECM消化物; 将冻干的C-ECM消化物加入到1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)-丙烯酸酯在磷酸盐缓冲盐水中的无菌过滤溶液中,以使C-ECM消化物上的丙烯酸酯基团官能化; 将EDC-NHS-丙烯酸酯的无菌过滤溶液与C-ECM在37℃孵育30分钟,并在使用Tris缓冲液孵育之后停止EDC-NHS-丙烯酸酯反应,并且在与EDC-NHS-丙烯酸酯溶液孵育之后的C-ECM消化被称作丙烯酸酯改性C-ECM; 离心过滤浓缩C-ECM消化液,除去未反应的EDC和NHS-丙烯酸酯,冷冻干燥丙烯酸酯改性的C-ECM消化液; 和将溶解在无菌蒸馏水中的PEGDA加入到丙烯酸酯改性的C-ECM消化液中,其中,通过加入过硫酸铵和抗坏血酸,然后孵育,通过自由基聚合诱导凝胶化。 13
 
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