| 一种人脐带间充质干细胞的分离培养扩增方法及系统 |
| CN202110669236.4 2021-6-17 发明申请 |
| 2021-8-13 |
| 本发明提出了一种脐带间充质干细胞分离培养扩增方法及系统,包括,步骤一:样本预处理,步骤二:华通氏胶的获取,将华通氏胶剪成小块组织,加入体积为所述小块组织体积的3.5倍的过滤后的红细胞裂解缓冲液,步骤三:胶原酶消化,所述消化溶液是包含1%IV型胶原酶、0.5%透明质酸酶、300U/ml DNA酶和2%血清替代物的平衡盐溶液;步骤四:原代细胞分离培养,添加间充质干细胞的无血清培养基以得到细胞悬浮液,加入脐带间充质干细胞专用原代细胞培养液进行原代培养;步骤五:细胞传代培养,使用0.215%的质量百分比浓度的胰蛋白酶,将收集的细胞按照5000个/cm2接种;步骤六:将脐带间充质干细胞收集后进行成骨分化、成脂分化和成软骨分化实验。 |