| 一种从脂肪干细胞提取旁分泌因子的方法 |
| CN202011060053.4 2020-9-30 发明申请 |
| 2020-12-15 |
| 本发明公开了一种从脂肪干细胞提取旁分泌因子的方法:取采集的脂肪样本,用生理盐水洗涤1~3次;加入适量脂肪细胞消化液进行消化;离心,重悬细胞沉淀,用无血清培养基原代培养;传代培养;扩大培养;用旁分泌因子提取液提取,纯化,得旁分泌因子;所述旁分泌因子提取液,是由PBS缓冲液、L?谷氨酰胺、D?葡萄糖和L?抗坏血酸组成的,L?谷氨酰胺、D?葡萄糖和L?抗坏血酸的浓度分别为:1~3mmol/L,10~20μmol/L,10~100μmol/L。本发的方法可从脂肪组织中稳定的提取脂肪干细胞,并利用脂肪干细胞提取脂肪干细胞旁分泌因子,细胞质量和因子提取效率稳定,脂肪干细胞在GMP环境下分离并长期培养,不接触任何动物源性成分,可高效表达表达CD29、CD44、CD105等脂肪干细胞标志物。 |