| 一种用于产生软骨细胞和/或软骨,任选关节样非肥大软骨细胞和/或软骨样组织和/或肥大软骨细胞样细胞和/或软骨样组织的方法,该方法包括:a。 用指定鸡尾酒的近轴中胚层培养原始条纹状中胚层群体,任选地CD56+,PDGFR+KDR-原始条纹状中胚层群体,所述鸡尾酒包含:i。 FGF激动剂;II。 BMP抑制剂; 任选地noggin,LDN-193189,dorsomorphin; 安迪III。 任选的一种或多种TGF抑制剂,任选的SB431524; 和Wnt抑制剂,任选地DKK1,IWP2或XAV939;以指定表达细胞表面CD73,CD105和/或PDGFR-的近轴中胚层群体; 产生软骨细胞前体群体,包括:i。 以高细胞密度任选地在无血清或含血清培养基中培养表达CD73,CD105和/或PDGFR-的近轴中胚层群体;ii。 在无血清培养基中用TGF3激动剂培养高细胞密度CD73+,CD105+和/或PDGFR+近轴中胚层群体,以产生高细胞密度SOX9+,胶原2+软骨细胞前体群体; 和c。 任一i。 用TGF3激动剂长时间培养高细胞密度SOX9+,胶原2+软骨细胞前体群体,以产生关节样非肥大软骨细胞和/或软骨样组织; ORII. 用BMP4激动剂长时间培养高细胞密度的SOX9+胶原2+软骨细胞前体群体,以产生肥大的软骨细胞样细胞和/或软骨样组织。 |