干细胞高效表达目的蛋白的制备方法和应用方法
 
CN202010295429.3  2020-4-15  发明申请

2020-7-24
 
  本发明公开了一种干细胞高效表达目的蛋白的制备方法和应用方法,其中制备方法包括:从人体组织中分离干细胞并进行培养;结合PB转座子、EF1A启动子序列、KOZAK序列、所要表达的目的蛋白序列、T2A序列、所要表达目的蛋白序列、CD33信号肽序列、IRES序列、PURO序列和附加体系统,构建重组表达载体;将重组表达载体加入干细胞的培养悬液,采用电转染方式获得能够表达目的蛋白的干细胞。通过本发明的技术方案,可以将重组表达载体转移至干细胞中,迅速获得高表达的细胞,可以增加两种细胞因子的协同作用,使两种细胞因子同时表达,使重组表达载体质粒在干细胞内长时间存在并高效表达目的蛋白。
 
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