| 一种胎盘间充质干细胞外泌体的制备和储存方法 |
| CN201911397112.4 2019-12-30 发明申请 |
| 2020-5-1 |
| 本发明涉及胎盘间充质干细胞外泌体的制备和储存方法,属于干细胞与再生医学技术领域。该方法,包括以下步骤:将P3代胎盘间充质干细胞培养、待融合度达到80?90%后将其吸出培养基,更换DMEM培养基培养24h后收集上清液,去除细胞碎片,再通过0.22μm无菌过滤膜过滤,取滤液在13000r/min转速下离心60min,上清液通过0.22μm无菌过滤膜过滤,即得到高纯度外泌体,最后用生理盐水重悬并13000r/min离心65min,获得浓缩的外泌体;外泌体加入含SR无血清培养基、甘油和维生素C的冻存液,?80℃冰冻24h后取出,再放入?196℃液氮中冻存。上述胎盘间充质干细胞外泌体的制备方法,针对常规技术中的不足,通过调整提取方法和改良冻存液,取得高纯度、高密度且能保持活性的外泌体。 |