产生软骨细胞谱系细胞和/或软骨样组织的方法和组合物
 
US15977536  2018-5-11  发明申请

2019-4-18
 
  一种用于产生软骨细胞和/或软骨,任选地关节样非肥大软骨细胞和/或软骨样组织和/或肥大软骨细胞样细胞和/或软骨样组织的方法,所述方法包括 : a。 培养原始条状中胚层群体,任选地CD56+,PDGFRALPHA+KDR-原始条状中胚层群体,其中近轴中胚层特异性鸡尾酒包括 : i。 FGF激动剂;II。 BMP抑制剂; 任选地Noggin,LDN-193189,Dorsomorphin; ANDIII。 任选地一种或多种TGFbeta抑制剂,任选地SB431524; 和Wnt抑制剂,任选地DKK1,IWP2或XAV939;用于指定表达细胞表面CD73,CD105和/或PDGFR-beta;b的近轴中胚层群体。 产生软骨细胞前体群体,包括 : i。 任选在无血清或含血清培养基中以高细胞密度培养表达CD73,CD105和/或PDGFR-BETA的近轴中胚层群体;II。 在无血清培养基中用TGFbeta3激动剂培养高细胞密度CD73+,CD105+和/或PDGFrbeta+近轴中胚层群体,以产生高细胞密度SOX9+,胶原蛋白2+软骨细胞前体群体; 和c。 i。 用TGFbeta3激动剂培养高细胞密度的SOX9+,胶原2+软骨细胞前体群一段延长的时间,以产生关节样非肥大软骨细胞和/或软骨样组织; ORII。 用BMP4激动剂长时间培养高细胞密度的SOX9+胶原2+软骨细胞前体细胞群,以产生肥大的软骨细胞样细胞和/或软骨样组织。
 
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