| 酿酒酵母中延胡索酸酶的提取 |
| CN202011561058.5 2020-12-25 发明申请 |
| 2022-7-1 |
| 本发明公开了一种延胡索酸酶分离纯化的新工艺；本发明是这样来实现的：将酿酒酵母细胞悬浮液按质量分数4比10悬浮于pH为7.5的100mol/L磷酸钾缓冲液中，分别用珠磨搅拌机和超声冰浴方式进行细胞破碎30min，悬浮液4000rpm离心5min，取上清液调节pH至7.5，弃去沉淀，留上清液加入丙酮低温静置后可见沉淀析出；干燥称量；其活力测定用单位时间苹果酸的减少量表示，紫外可见分光光度计测定330nm波长处的吸光度的增加量。其特征在于细胞破碎时采取超声冰浴方式，可通过超声波的空化作用将存在于亚细胞结构上的酶蛋白分离下来，从而提高分离纯化效率。与普通珠磨搅拌纯化制备方法比较发现超声冰浴破碎细胞方式所得到的延胡索酸酶得率高、活力大。 |
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