| 一种基于Split GFP定量评估微生物细胞表面展示效率的方法 |
| CN202210880733.3 2022-7-25 发明申请 |
| 2024-1-26 |
| 本发明提供了一种基于Split GFP的多层次细胞表面展示评估方法，1)将GFP10或GFP10?11片段与锚定蛋白和乘客蛋白融合，诱导表达后加入GFP1?10或GFP1?9孵育，用荧光显微镜快速定性评价是否成功表面展示；2)通过酶标仪测定孵育后细胞的荧光强度，建立体外Split GFP自组装复合物的荧光强度与GFP11或GFP10?11浓度的标准曲线，定量评估表观目的蛋白展示数量；3)用过流式细胞技术测定成功表面展示的细胞比例，并定量评估成功表面展示细胞表面目的蛋白的展示数量。本发明具有操作简便，成本低廉，对目的蛋白的结构和功能影响小，评估全面、准确，适用性广等优点，可以有效促进新型表面展示系统的开发和应用，具有重要应用价值。 |
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