| 伪中间葡萄球菌诱导犬角膜上皮细胞焦亡模型的建立方法和应用 |
| CN202310996935.9 2023-8-9 发明申请 |
| 2024-1-9 |
| 本发明属于生物技术领域，具体涉及伪中间葡萄球菌诱导犬角膜上皮细胞焦亡模型的建立方法和应用，包括以下步骤：将复苏与传代后的犬角膜上皮细胞按MOI＝1 : 1加入对数生长期的伪中间葡萄球菌培养3h，加入庆大霉素和溶菌酶清除胞外菌，后添加低浓度的溶菌酶和庆大霉素进行维持培养3h，培养后使用细胞刮沿一个方向刮下细胞收集并离心，加入戊二醛溶液固定，乙醇梯度脱水，使用不含EDTA的胰酶消化细胞，采用流式细胞仪检测，以PI+/Caspase?1+判定为Caspase?1介导的细胞焦亡。该实验方法操作简单，可成功构建伪中间葡萄球菌诱导犬角膜上皮细胞焦亡模型，重复性高，不会导致细胞出现细胞坏死或凋亡。 |
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