| 一种H7N9亚型禽流感假病毒的制备方法 |
| CN202311074108.0 2023-8-24 发明申请 |
| 2023-11-17 |
| 一种H7N9亚型禽流感假病毒的制备方法,将293T细胞于37℃、5%CO2培养,使转染时细胞密度达到65?75%,24h后四质粒共转染,包括pNL4?3.Luc.R?E?、pCAGGS?TMPRSS2、pcDNA3.1(+)?HA以及pcDNA3.1(+)?NA;配置Dulbecco’s Modified Eagle Medium、质粒以及PEI MAX?Transfection Grade Linear Polyethylenimine Hydrochloride混合溶液,最后将混合溶液倒入细胞培养瓶中;18 h后换为完全培养基,48h后收取上清,300g、4℃、离心10 min;进行病毒滴定感染实验,使用293T?ST6GAL1细胞以5×103 cells/孔铺于96孔中,第二天,加入病毒上清,设置一个复孔,37℃培养48 h,使用多功能酶标仪测相对荧光单位。本发明制备的H7N9亚型禽流感假病毒更安全,且具有敏感性和快速性的特点。 |