| 一种高通量筛选PARG抑制剂的方法及其应用 |
| CN202211644289.1 2022-12-20 发明申请 |
| 2023-4-11 |
| 本发明涉及药物化学技术领域,尤其是涉及一种高通量筛选PARG抑制剂的方法及其应用,该方法包括以下步骤:S1、将组蛋白包被在酶标板中;S2、向酶标板中加入酶反应体系,酶反应体系包括:PARP1、DNA和生物素标记的NAD;S3、向酶标板中加入不同浓度的PARG抑制剂;S4、向酶标板中加入PARG;S5、向酶标板中加入标记HRP的链和亲霉素抗体以及HRP检测试剂,通过酶标仪读取化学发光信号值,并通过化学发光信号值拟合得到PARG抑制剂的IC50值。本发明的实验体系稳定,且降低了荧光的干扰,大大降低了假阴性的结果;而且在检测过程中可以通过对组蛋白进行ADP?核糖化,极大的降低了成本,且不需要额外的制备ADP?核糖化底物,保证了每次实验的重复性。 |