| 一种筛选强组成型启动子的方法 |
| CN202310264922.2 2023-3-17 发明申请 |
| 2023-6-27 |
| 本发明公开了一种筛选强组成型启动子的方法，属于生物技术领域。本发明为解决目前大多数启动子文库的构建都是基于在现有启动子的基础上进行随机突变或是通过组学数据筛选的技术问题，基于对大肠杆菌MG1655，枯草芽孢杆菌168及谷氨酸棒杆菌ATCC13032的基因组进行随机打断，并将打断后的片段连接在报告基因绿色荧光蛋白GFP的上游，然后克隆至载体pUC19中，构建得到3个不同来源的随机文库。采用流式细胞仪技术(FACS)分选荧光强度明显增高的突变子，最终筛选得到一株来源于枯草芽孢杆菌168的突变子，其荧光强度比对照菌株高出19.7倍。最后通过序列截短鉴定出这段序列中最关键的60bp启动子序列。 |
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