| 基于流式细胞仪鉴定马铃薯倍性的高通量样品制备方法 |
| CN202210773516.4 2022-7-1 发明申请 |
| 2023-5-12 |
| 本发明公开了一种基于流式细胞仪鉴定马铃薯倍性的高通量样品制备方法,步骤如下:1)取新鲜马铃薯茎尖嫩叶,用灭菌ddH2O清洗叶片表面,擦干,放入1.5mL离心管中,加入预冷的裂解液1mL和三颗3mm小钢珠,于磨样机中磨至细碎,冰上静置30min,使细胞充分裂解;2)吸取离心管中的裂解液,用400目的滤膜将其过滤至新的1.5mL的离心管中;3)离心并弃上清,留沉淀即细胞核;4)加1mL预冷的裂解液,涡旋震荡,后加20μL预冷的PI染料,与4℃避光染色15min,使DNA与PI充分结合,后用400目的滤膜过滤至流式管中,上机检测。本发明首次采用钢珠打样法,即磨样机+直径3mm小钢珠进行样品制备,具有背景杂质少,试验结果准确,可高通量鉴定等优点。 |