| 一种泡桐茎尖细胞核的提取方法及应用 |
| CN202211694365.X 2022-12-28 发明申请 |
| 2023-4-25 |
| 本发明提出了一种泡桐茎尖细胞核的提取方法及应用,其中泡桐茎尖细胞核提取方法包括如下步骤:S1,泡桐种子处理取成熟完整的泡桐种子,经消毒处理后置于MS培养基中培养40?50d,直至长出幼茎;S2,泡桐幼茎预处理用镊子取下泡桐幼茎在DPBS溶液中清洗2?3次;S3,裂解取步骤S2清洗后的泡桐幼茎放入裂解液中,并用刀片切5?10min,制成悬浮液;S4,分离用细胞筛过滤除杂,然后离心分离,去除上清液得到细胞核;S5,分选将细胞核用DPBS溶液重悬除杂然后加入DAPI染料,染5?10min后用流式细胞分选仪进行分选。本发明通过在裂解液中加入MOPS、柠檬酸钠和DTT,增加了细胞核的完整性,降低了碎片率,满足单细胞核转录组测序的要求。 |