| 一种基于流式细胞术测定重组杆状病毒滴度的方法 |
| CN202211032512.7 2022-8-26 发明申请 |
| 2023-3-14 |
| 本发明公开了一种基于流式细胞术测定重组杆状病毒滴度的方法，包括以下步骤：构建结构为信号肽?靶蛋白?linker?eGFP的融合蛋白，将所述融合蛋白的序列亚克隆入pFastBac1载体中；将重组载体制备重组bacmid DNA，再转染Sf9细胞，制备病毒毒液；梯度稀释病毒毒液，并分别加入Sf9细胞液，孵育后离心洗涤，重悬后用流式细胞仪检测，记录病毒稀释梯度和不同稀释梯度对应的表达eGFP细胞的百分比，进而计算病毒滴度。该方法直接利用现有体系进行检测，无需培养贴壁细胞，而且可直接检测感染病毒的效力，其操作简单、高效、准确性高，具有应用价值。 |
微信公众号