| 一种苯乙醇胺-N-甲基转移酶的高通量筛选方法 |
| CN202210670475.6 2022-6-14 发明申请 |
| 2022-8-5 |
| 本发明公开了一种苯乙醇胺?N?甲基转移酶的高通量筛选方法。在酶标仪的96孔板中加入底物去甲肾上腺素和S?腺苷蛋氨酸、PBS缓冲液、S?腺苷?L?同型半胱氨酸水解酶SAHH，加入酶样品苯乙醇胺?N?甲基转移酶，在微孔板震荡反应器中，20?50℃，500?1000rpm，反应1?3h，4℃，3700rpm离心，取上清，再加入化合物NDCC反应0?90min，反应过程中每隔1?30min取出酶标板，酶标测定其吸光值；根据吸光值变化，酶活定义为在特定条件下，每分钟OD405nm吸光值的变化*1000000。本发明具有操作简单、成本低廉、检测准确等特点，对苯乙醇胺?N?甲基转移酶的定向进化具有深远意义。 |
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