一种哺乳动物细胞疾病模型的高通量构建方法
 
CN202210360423.9  2022-4-7  发明申请

2022-5-6
 
  本发明公开哺乳动物细胞疾病模型的高通量构建方法,包括如下步骤:应用生物信息学方法将NCBI中ClinVar数据库的C?to?T或G?to?A单核苷酸的变异位置、基因名称信息进行整理,根据相关基因靶点的筛选原则对用于构建疾病细胞模型的gRNA进行设计;利用设计的gRNA引入动物细胞、对目的基因进行基因编辑,包括应用高通量纳声移液工作站进行gRNA质粒构建,应用高通量液体处理工作站将gRNA质粒和BE4max质粒共转入哺乳动物细胞中,通过外加药物高通量培养筛选、收集样品、测序,分析编辑效率,最后用流式细胞仪分选单克隆获取具有目标突变的疾病细胞模型。本发明可以使用标准化的工作流程,高效产生疾病细胞模型。
 
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