| 一种用分子信标快速检测金黄色葡萄球菌的方法 |
| CN201110237715.5 2011-8-18 发明申请 |
| 2012-1-4 |
| 本发明提供的一种用分子信标快速检测金黄色葡萄球菌的方法，1)针对金黄色葡萄球菌ATCC25923的16SrRNA的片断选择靶序列，人工设计分子信标探针MB，其碱基组成为：5’-FAM-ACGGACGAGAAGCTTGCTTCT-DABCYL-3’，其中5’端用FAM标记，3’端用DABCYL标记，荧光基团激发波长495nm，检测波长520nm；并设计出与分子信标完全互补的寡核苷酸(P：5’-ACGGACGAGAAGCTTGCTTCT-3’)；2)通过对分子信标特性确定荧光原位杂交的温度为50℃，计算分子信标S/B值；3)用流式细胞仪进行荧光原位杂交，确定去离子甲酰胺的浓度为10%，金黄色葡萄球菌的菌液浓度为20x105cfu/μl，分子信标的浓度为10ng/μl。 |
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