| 一种用于检测血液中肿瘤突变基因的方法 |
| CN201110218578.0 2011-7-29 发明申请 |
| 2011-11-23 |
| 本发明涉及一种用于检测血液中肿瘤突变基因的方法,该方法包括以下步骤:(1)配制含TBE的聚环氧乙烷筛分介质;(2)提取血液样品中基因组DNA;(3)需检测基因目的片段扩增:将基因组DNA作为扩增模板,进行常规PCR扩增,即得p53基因PCR扩增样品和k-ras基因PCR扩增样品;(4)样品处理:将p53基因PCR扩增样品和k-ras基因PCR扩增样品经变性或酶切后分别得到变性样品溶液、酶切样品溶液;(5)样品检测:分别在变性样品溶液和酶切样品溶液中加入10×SYBR Green I荧光染料与基因组DNA,混匀后加入去离子水至体系为30~50μl;然后,使用毛细管电泳仪压力系统自动填充聚环氧乙烷筛分介质,分别进行CE-SSCP或CE-RFLP检测即可。本发明操作简单、重现性好。 |