| 大菱鲆荧光标记微卫星六重PCR家系识别方法 |
| CN200910203303.2 2009-5-25 发明申请 |
| 2010-2-3 |
| 一种大菱鲆荧光标记微卫星六重PCR家系识别方法,利用三种荧光(6FAM, HEX和NED)对六对引物根据其PCR扩增产物大小进行了两两标记;利用引物设 计软件排除这六对引物在PCR反应过程中形成二聚体的可能,组合这六对引物 于同一个PCR反应体系中,反应体系中包括ROX荧光分子内标;调整PCR反应 体系,建立这六对引物可在同一个PCR反应体系中同时扩增的参数和合适的PCR 反应程序;PCR产物经ABI3130或类似基因分析仪根据荧光标记进行大菱鲆六 个微卫星位点分析。此六重PCR技术可提高大菱鲆微卫星标记的检测效率,单 亲排除率为99.63%,个体识别力99.99%,可以对大菱鲆不同家系进行区分或者 进行个体间及亲子之间的识别和鉴定。 |