| 微球悬浮杂交的定量及其应用 |
| US11465108 2006-8-16 发明申请 |
| 2009-5-28 |
| 采用一种新的悬浮杂交技术，用流式细胞仪测定核酸拷贝数。 用100至2304bp长的低拷贝(LC)产物与光谱不同的聚苯乙烯微球缀合来验证该测定。 在本文提供的实施例中，这些缀合微球用作多重杂交探针以检测从细胞遗传学细胞沉淀中提取并用生物素-dUTP标记的基因组DNA中的同源序列。 藻红蛋白标记的链霉亲和素检测杂交，流式细胞术分析杂交结果。 通过比较患者样本和异常细胞系基因组DNA中测试探针和二倍体参考探针的平均荧光强度，可以区分拷贝数差异。 该分析能够从双等位基因参考序列中区分测试位点处的单个等位基因和三个等位基因，而不管染色体背景如何。 该方法是对先前需要事先扩增位点特异性靶DNA的方法的改进，因为LC探针为同源靶的精确拷贝数测定提供了足够的特异性和敏感性。 由于其高灵敏度和高准确度，该测定法可用于多种应用中核酸拷贝数的测定，包括人类基因组拷贝数的测定、疾病动物模型和溶液中的基因组拷贝数的测定、转录物水平的测定、法医DNA分析和农业中的质量控制分析。 |
微信公众号