| 应用流式细胞术检测病毒载体类基因治疗药物感染滴度 |
| CN200810147329.5 2008-8-7 发明申请 |
| 2009-3-18 |
| 本发明公开了一种流式细胞术检测病毒载体类基因治疗药物感染滴度的方法。首先建立 了模拟病毒感染细胞特点的基于泊松分布的数学模型,并且确定了相应计算方法。具体实施 步骤为:细胞铺六孔板,待细胞长满后选择一孔计数,病毒感染细胞,培养一定时间后消化, 收集细胞,将收集的细胞依次固定,渗透化,封闭,一抗孵育,FITC标记的二抗孵育,用流 式细胞仪检测,将所得结果根据所建立的数学模型做曲线拟合,结果判定。将该方法与传统 方法如噬斑法,免疫荧光法做对比,证实该方法更准确,精密度高,而且不受细胞状态和病 毒感染细胞后培养过程中细胞分裂的影响。该方法的建立对于此类产品的质量控制和临床应 用有重要意义。 |