| 人胚肾293细胞亚克隆细胞株 |
| CN03126889.7 2003-6-13 发明申请 |
| 2004-7-21 |
| 一种用于生产重组腺病毒制品的人胚肾293细胞 亚克隆细胞株，该细胞株是由ATCC 293细胞经亚克隆方法制 得，它含有人三磷酸甘油醛脱氢(human glyceraldehydes－3－ phosphate dehydrogenase，GAPD)，该细胞株由下列方法培养 制得：a、将ATCC 293细胞(P32)复苏后进行细胞扩增传代至 第33代次(P33)，然后将P33细胞悬液用FACS流式细胞仪进 行亚克隆；b、用2个96孔板，每孔中0.2ml培养基中放置一 个细胞，在36～38℃、3～6％CO2条件下培养6～10天；c、挑选出细胞形态均一、生长良好的、已达到不低于60％铺满生长的克隆；d、重复上述步骤四次，最后挑选出1个亚克隆的细胞柱(P37)，继续培养扩增并制成原代细胞库(P38)，置于－80℃冻存；e、以原代细胞库(P38)为基础制备主代细胞库及工作细胞库。本发明应用基因工程技术和分子克隆技术，使其具有明显增强细胞的贴壁生长的功能和细胞生长倍增时间短的优点。 |
微信公众号