| 本发明涉及使用流式细胞仪-微载体基因芯片, 对核酸进行“高通量”式分析的技术,材料和试剂盒。本发明 的具体实施方式之一,是用连接生物素蛋白(Biotin)的引物启动 靶核酸扩增;在核酸探针上连接磁性微粒和荧光物质,与靶核 酸单链杂交,并通过磁场,将靶核酸单链-探针分离提纯;用 包被抗生物素蛋白的高聚分子微粒作为微载体,连接靶核酸单 链-探针,产生可供流式细胞仪分析的微载体-靶核酸单链- 探针(荧光);本发明的另一具体实施方式,涉及使用“双探针 -三明治法”测定靶核酸单链。设计识别靶核酸单链两端序列 的两个探针,一个探针连接磁性微粒和荧光,作为检测探针; 将检测探针与靶核酸单链杂交,并通过试管外磁场分离纯化, 产生靶核酸单链-检测探针复合物;另一探针连接生物素蛋 白,作为捕获探针。将捕获探针与微载体上的抗生物素蛋白连 接,再与靶核酸单链-检测探针杂交,产生可供流式细胞仪分 析的微载体-捕获探针-靶核酸单链-检测探针(荧光);本发 明的另一具体实施方式,是对以上产物进行多价流式细胞仪分 析。根据微载体的不同直径和不同内置荧光,以及探针的不同 荧光,在一个试管内同时测定多种靶核酸单链,形成高通量式 分析模式;本发明的另一具体实施方式,是流式细胞仪-微载 体核酸芯片临床诊断和实验室检验试剂盒,用于病原体(病毒, 细菌,真菌,衣原体和支原体等)、炎症反应、免疫反应、肿瘤、 细胞内信号蛋白等基因测定。 |